肌酐酶(creatininase, CA)是一种使用于体外检测试剂的重要东西酶，现在主要由微生物法出产，存在产值低和活性差的问题，约束了其实践使用。该研讨经过全基因组成和异源表达构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a-CA，取得了高性能肌酐酶。经过单要素试验和呼应面规划剖析确认最优培育基组成，并系统地优化了发酵条件，来进步了肌酐酶表达量。培育基优化试验依据效果得出，最优培育基各组分为：葡萄糖10.33 g/L、酵母浸粉21.80 g/L、磷酸盐137.63 mmol/L和胰蛋白胨15.60 g/L。经过5 L发酵罐发酵工艺优化，极大地进步了肌酐酶的生机，在接种量为4%、诱导温度为25 ℃、诱导时刻为18 h、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度为0.2 mmol/L、溶氧值为30%条件下，其生机到达470.24 U/mL，比酶活为367.38 U/mg。该研讨为肌酐酶的出产和工业化使用供给了理论基础和技术支持。

  本文使用来源于P. putida的肌酐酶基因完结在大肠杆菌中完结外源表达，对重组工程菌的发酵培育基和发酵条件的优化，首要在摇瓶培育水平上对发酵培育基营养成分品种和浓度进行了单要素优化，再经过BBD试验对各个要素进行呼应面优化规划，得到发酵培育基优化配方：葡萄糖10.30 g/L、酵母浸粉21.80 g/L、磷酸盐137.60 mmol/L、胰蛋白胨15.60 g/L，并在5 L发酵罐中，优化发酵条件：接种量为4%，诱导温度25 ℃，诱导时刻18 h，IPTG浓度0.2 mmol/L，溶氧值30%，此刻，粗酶液中酶活为470.24 U/mL，此刻比酶生机到达367.38U/mg，肌酐酶的产酶量和活性显着进步。

  河北工业大学生物催化与转化团队由姜艳军教授领衔，团队面向生物制作、生物催化、生物质能源和环境保护等方面的严重需求，构建高效的工业生物催化与转化系统，大幅度进步工业生物催化与转化的功率，降造本钱并削减环境污染，为绿色开展和化工工业转型晋级供给有力支撑。

  该团队现有教师10人，博士生12人，硕士生54人。团队承当国家“绿色生物制作”要点专项、国家天然科学基金、企业托付课题等项目40余项，宣布SCI论文120余篇，请求或授权我国发明专利80余项。团队导师分获天津市天然科学一等奖、河北省天然科学二等奖、我国石油和化工教育教育效果特等奖等奖赏，多人次当选国务院特贴专家和天津市“131”立异式人才，并当选“全球前2%尖端科学家榜单”。团队秉承“面向未来，兢兢业业、终身学习”的理念，据守立德树人的初心，牢记为国育才的任务，发奋奋斗，勇于开拓。团队培育优异研讨生100余名，17名研讨生取得国家奖学金、省级优异毕业生、省级优异毕业论文，20余名硕士研讨生在清华大学、天津大学、南开大学等国内闻名学府持续进修,工作毕业生也在不一样的职业做出应有奉献。

  姜艳军，化工节能进程集成与资源使用国家当地联合工程试验室主任，河北工业大学化工学院副院长，我国轻工业生物转化与天然产品开发要点试验室主任，主要是做生物催化与转化、酶工程等方面的研讨。掌管或完结国家要点研制方案课题1项、国家天然基金3项、省部级课题10余项，宣布SCI论文120余篇，请求专利40余项；获河北省天然科学二等奖、我国化工学会基础研讨效果奖二等奖、天津市天然科学一等奖等奖赏；当选天津市“131”立异式人才榜首层次、河北省“三三三人才工程”、河北省高校百名优异立异人才、天津市立异人才推动方案青年科技优异人才、河北省第一批青年优秀人才以及“全球前2%尖端科学家榜单”等。